Зачем необходима лабораторная диагностика вирусных инфекций?

Для установления или подтверждения диагноза вирусной инфекции кожи в лаборатории проводится широкий спектр исследований. Несмотря на то, что тщательный сбор анамнеза и клинический осмотр пациента имеют решающее значение, лабораторные тесты помогают клиницисту верифицировать диагноз и выбрать правильную тактику лечения.

Что представляет собой мазок-соскоб с кожи на вирусы?

Мазок-соскоб на вирусы берут стерильным инструментом (зондом-тампоном), осторожно протирая видимый элемент кожной сыпи или основание вскрытой везикулы. Затем тампон помещают в специальную вирусную транспортную среду и отправляют в лабораторию для культурального исследования или молекулярной идентификации вируса.

Какие микроорганизмы можно выявить с помощью мазка-соскоба?

Мазок со слизистых оболочек или очагов поражения на коже позволяет выявить:

Кроме того, мазок со слизистой оболочки полости рта позволяет обнаружить:

Забор мазка-соскоба с кожи на вирусные инфекции

Что такое вирусологический посев (культуральный метод)?

Вирусологический посев заключается в заражении клиническим образцом чувствительной клеточной культуры. Если в клетках развиваются специфические морфологические изменения (цитопатическое действие), результат культуры считается положительным. С помощью культивирования можно идентифицировать ВПГ, вирус варицелла-зостер, морбилливирус (возбудитель кори) и другие патогены.

Какие анализы крови необходимы?

Лабораторные исследования крови при подозрении на вирусную инфекцию включают:

  • Клинический анализ крови: вирусная инфекция может приводить как к лейкоцитозу, так и к лейкопении; нередко обнаруживаются атипичные мононуклеары.
  • C-реактивный белок (СРБ): уровень обычно умеренно повышен, но при неосложненной вирусной инфекции, как правило, составляет менее 50 мг/л (СРБ является неспецифическим маркером системного воспаления).
  • Прокальцитонин: остается в пределах нормы (отрицательный). Данный показатель служит высокоспецифичным маркером генерализованного сепсиса и тяжелой бактериальной инфекции.
  • Серологические тесты: исследование парных сывороток с интервалом в 10–14 дней для оценки нарастания титра антител и выявления специфического иммунного ответа.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Метод ПЦР основан на выделении и многократном копировании (амплификации) специфических фрагментов вирусной ДНК или РНК. Соскобы и мазки с кожи позволяют быстро и высокоточно обнаружить:

  • Вирус простого герпеса (HSV 1, 2)
  • Вирус варицелла-зостер (VZV)
  • Энтеровирусы и вирусы Коксаки
  • Вирус папилломы человека (ВПЧ / HPV) — этиологический фактор развития вирусных бородавок, аногенитальных кондилом и некоторых видов эпителиальных злокачественных опухолей
  • Вирус контагиозного эктиматозного дерматита (вирус Орф — парапоксвирус, передающийся от овец и коз и вызывающий контагиозный эктимоид).

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Метод ИФА направлен на обнаружение специфических вирусных антигенов в период острой фазы заболевания либо, чаще, циркулирующих противовирусных антител (иммуноглобулинов классов IgM и IgG). Обнаружение антител IgG свидетельствует о предшествующем контакте с патогеном или перенесенной ранее инфекции и не всегда указывает на текущий активный процесс.

Чаще всего серологически исследуют антитела к следующим патогенам:

  • Вирус варицелла-зостер (VZV)
  • Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ)
  • Вирусы гепатита B и C, являющиеся основными причинами хронических вирусных гепатитов с кожными проявлениями.

Биопсия кожи

Гистологическое исследование биоптата кожи имеет высокую ценность при сложной дифференциальной диагностике вирусных дерматозов. При световой микроскопии или цитологической пробе Цанка можно обнаружить характерное вирусное цитопатическое действие (баллонирующую дистрофию, гигантские многоядерные клетки, внутриядерные включения) либо патогномоничные морфологические маркеры конкретной инфекции.

Что такое электронная микроскопия?

Электронная микроскопия основана на просвечивании образца пучком электронов, что дает изображение с существенно более высоким разрешением, чем обычная световая микроскопия. В рутинной практике метод используется редко, однако он незаменим для верификации атипичных и орфанных вирусных инфекций кожи у иммунокомпрометированных пациентов с нестандартной клинической картиной.

Что такое определение противовирусной резистентности?

Тестирование на лекарственную устойчивость вирусов проводится для подбора эффективной этиотропной терапии. Способность вирусов к быстрой мутации создает клинические трудности в связи с развитием резистентности к противовирусным препаратам. Наибольшее практическое значение имеет резистентность ВИЧ к антиретровирусным препаратам (АРВТ), которая несет прямую угрозу жизни при потере вирусологического контроля.

Определение резистентности чаще всего проводят на геномном уровне (генотипирование), секвенируя генетический материал штамма вируса для выявления известных мутаций устойчивости. Реже используют фенотипическое тестирование, при котором живую культуру вируса от пациента инкубируют с различными концентрациями препаратов in vitro, оценивая степень подавления репликации.

Список литературы

  • Haycox CL, Kim S, Fleckman P, Smith LT, Piepkorn M, Sundberg JP, Howell DN, Miller SE. Trichodysplasia spinulosa — a newly described folliculocentric viral infection in an immunocompromised host. J Investig Dermatol Symp Proc 1999; 4: 268–71. PubMed
  • Mayer, K. Clinical use of genotypic and phenotypic drug resistance testing to monitor antiretroviral chemotherapy. Clin Infect Dis 2001; 32(5): 774–82. PubMed

Дополнительные материалы на DermNet

 

Книги по дерматологии